近日,中國科學(xué)院分子植物科學(xué)卓越創(chuàng)新中心團(tuán)隊,解析了C4植物光合碳濃縮系統(tǒng)葉綠體膜四碳二羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白DiT1/2的高分辨率三維結(jié)構(gòu),闡釋了其底物選擇性識別和轉(zhuǎn)運(yùn)的分子機(jī)制與進(jìn)化歷程,為理解C4光合作用提供了分子見解。
C4植物擁有高效的CO2濃縮機(jī)制(CCM),細(xì)胞特異性表達(dá)的二羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白DiT1/2是C4植物CCM功能實(shí)現(xiàn)的關(guān)鍵。當(dāng)前,DiT蛋白如何選擇性識別底物,以及如何實(shí)現(xiàn)Na+非依賴性跨葉綠體膜轉(zhuǎn)運(yùn),仍是待解的科學(xué)問題。
研究團(tuán)隊對多種植物來源的DiT蛋白進(jìn)行異源表達(dá)嘗試,發(fā)現(xiàn)擬南芥來源的DiT蛋白(AtDiT)在異源表達(dá)體系方面表現(xiàn)更優(yōu)。研究利用冷凍電鏡技術(shù),解析了AtDiT1與AtDiT2.1分別結(jié)合不同底物以及處于不同構(gòu)象的三維結(jié)構(gòu),揭示了決定底物選擇性的分子基礎(chǔ)。研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn),植物DiT蛋白利用兩個保守的正電荷氨基酸,在空間和靜電作用上模擬動物同源蛋白中Na+離子的功能,穩(wěn)定底物結(jié)合口袋,實(shí)現(xiàn)了不依賴Na+的電梯式轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。
在追溯DiT蛋白的進(jìn)化軌跡時,研究發(fā)現(xiàn)了一個與植物登陸過程密切關(guān)聯(lián)的氨基酸替換,該替換增強(qiáng)了DiT1對草酰乙酸的結(jié)合能力。DiT1作為葉綠體“蘋果酸閥”的核心組分,負(fù)責(zé)在高光脅迫下導(dǎo)出還原力以緩解光抑制。該功能強(qiáng)化或?yàn)樵缙谥参镞m應(yīng)陸地更強(qiáng)光照環(huán)境提供適應(yīng)性優(yōu)勢。
這一研究深化了關(guān)于C4光合核心元件的認(rèn)知,為未來通過合成生物學(xué)手段在C3作物中設(shè)計C4光合碳濃縮模塊,提供了直接的理論指導(dǎo)和潛在的蛋白工程改造靶點(diǎn)。
相關(guān)研究成果在線發(fā)表在《植物細(xì)胞》(The Plant Cell)上。研究工作得到國家自然科學(xué)基金和中國科學(xué)院相關(guān)項(xiàng)目等的支持。

DiT蛋白參與的植物生理過程及其轉(zhuǎn)運(yùn)底物
